Analytik

Reinheit durch Chromatografie

Die Umkehrphasen-Hochleistungsflüssigkeitschromatografie drückt eine gelöste Probe durch eine Säule, die Moleküle je nach ihrer Wasserabweisung zurückhält. Ein Detektor misst die Ultraviolettabsorption, meist bei etwa 214 bis 220 Nanometern, wo die Peptidbindung selbst absorbiert. Die Reinheit wird als Fläche des Hauptpeaks in Prozent aller Peaks angegeben.

Identität durch Massenspektrometrie

Die Massenspektrometrie misst die Masse des Moleküls, typischerweise nach Elektrospray-Ionisation oder mit MALDI-Flugzeitgeräten. Stimmt die gemessene Masse mit der aus der Sequenz berechneten überein, ist bestätigt, dass der Hauptbestandteil die gewünschte Kette ist. Sie zeigt auch Deletionen, bei denen ein Rest fehlt.

Reinheit ist nicht Gehalt

Ein Pulver, das laut Chromatografie zu 99 Prozent rein ist, besteht nicht zu 99 Gewichtsprozent aus Peptid. Gegenionen aus der Aufreinigung und Restwasser sind für den Ultraviolettdetektor unsichtbar und können einen merklichen Teil der Masse ausmachen. Der Nettopeptidgehalt wird getrennt bestimmt, klassisch durch Aminosäureanalyse.

Weitere Messungen

• Wassergehalt, durch Karl-Fischer-Titration.
• Gehalt an Gegenionen wie Acetat oder Trifluoracetat, durch Ionenchromatografie.
• Bakterielle Endotoxine, durch den Limulus-Amöbozyten-Lysat-Test oder rekombinante Alternativen.
• Sterilität, durch kulturbasierte Verfahren, die in Arzneibüchern festgelegt sind.

Ein Analysenzertifikat lesen

Ein Analysenzertifikat fasst die Ergebnisse für eine Produktionscharge zusammen: welche Verfahren verwendet wurden, was gemessen wurde und wann. Es beschreibt die Probe, die geprüft wurde. Es ist kein Beleg dafür, dass eine Substanz sicher, zugelassen oder für irgendeine Verwendung geeignet ist, und es sagt nichts über eine andere Charge aus.

Allgemeine Chemie, zur Orientierung geschrieben. Sie beschreibt nicht, wie eine Substanz anzuwenden ist.